国产一区二区欧美日韩在线-日韩国产精品亚洲第一成人av-日韩欧美国产一区二区在线-午夜一区精品国产亚洲av

免費咨詢熱線:
15522676233
技術文章
首頁 > 技術中心 > 細胞轉染的方法

細胞轉染的方法

 更新時間:2024-03-23 點擊量:225
  轉染(Transfection),是將外源性基因導入細胞內(nèi)的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。
  轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。那么你知道細胞轉染的方法有什么嗎?讓我們一起來看看吧!
  轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。
  一、化學轉染法:
  1.磷酸鈣法
  原理:磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜被細胞內(nèi)吞
  應用:穩(wěn)轉,瞬轉
  特點:不適用于原代細胞,操作簡便但重復性差,有些細胞不適用
  2.陽離子脂質法
  原理:帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內(nèi)吞
  應用:穩(wěn)轉,瞬轉,所有細胞
  特點:適用性廣,轉染效率高,重復性好,但轉染時需除血清,轉染效果隨細胞類型變化大
  3.DEAE-右旋糖苷法
  原理:帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸帶負電的磷酸骨架相互作用形成的復合物被細胞內(nèi)吞
  應用:瞬轉
  特點:相對簡便、結果可重復,但對細胞有一定的毒副作用,轉染時需除血清
  二、生物轉染法
  1.病毒介導法
  原理:通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中
  應用:穩(wěn)轉
  特點:可用于難轉染的細胞、原代細胞,體內(nèi)細胞等
  2.逆轉錄病毒
  應用:持定宿主
  特點:但攜帶基因不能太大細胞需處分裂,需考慮安全因素
  3.腺病毒
  原理:通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中
  應用:瞬時轉染,待定宿主
  特點:可用于難轉染的細胞,需考慮安全因素
  三、物理轉染法
  1.Biolistic顆粒傳遞法
  原理:將DNA用顯微重金屬顆粒沉淀,再將包被好的顆粒用彈道裝置投射入細胞,DNA在細胞內(nèi)逐步釋放表達
  應用:瞬轉
  特點:可用于:人的表皮細胞,纖維原細胞,淋巴細胞系以及原代細胞
  2.電穿孔法
  原理:高脈沖電壓破壞細胞膜電位,DNA通過膜上形成的小孔導入
  應用:穩(wěn)轉,瞬轉,所有細胞
  特點:適用性廣但細胞致死率高,DNA和細胞用量大
  3.顯微注射法
  原理:用顯微操作將DNA直接注入靶細胞核
  應用:穩(wěn)轉,瞬轉
  特點:染細胞數(shù)有限,多用于工程改造或轉基因動物的胚胎細胞
  更多有關細胞轉染的方法,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司。